一文读懂E2定量elisa 试剂盒的原理与操作流程
点击次数:16 更新时间:2025-06-19
E2定量elisa 试剂盒在雌激素水平检测领域应用广泛,无论是临床诊断还是科研实验,都离不开它的精准助力。想要用好这款试剂盒,了解其原理与操作流程是关键。
E2定量elisa 试剂盒基于抗原-抗体特异性结合的免疫学原理。E2(雌二醇)作为抗原,与特异性抗体能发生高度专一的结合反应。在试剂盒中,预先将针对E2的特异性抗体包被在微孔板上,加入待检样本后,样本中的E2会与包被抗体结合。随后加入酶标记的E2抗原,它也会与包被抗体结合,形成竞争关系。经过洗涤步骤,未结合的物质被去除,而结合在微孔板上的酶标抗原-抗体复合物得以保留。然后加入酶的底物,酶催化底物发生显色反应,颜色深浅与样本中E2的含量呈反比,通过酶标仪测定吸光度,即可根据标准曲线计算出样本中E2的浓度。
在操作流程上,首先要做好准备工作,确保实验环境洁净,将试剂盒和样本恢复至室温。接着进行加样,准确吸取样本和标准品加入微孔板,同时设置空白对照、阴性对照和阳性对照。加样完成后,轻轻振荡微孔板使反应充分,在适宜温度下孵育一定时间。随后进行洗涤,这一步骤需严格按照说明书操作,以去除未结合物质,避免影响检测结果。洗涤后加入酶结合物,再次孵育,之后加入底物显色,显色时间需精确把控。较后加入终止液终止反应,迅速用酶标仪在规定波长下测定吸光度,分析数据得出检测结果。
掌握E2定量elisa 试剂盒的原理与操作流程,能帮助我们更科学、准确地完成检测工作,为相关研究和诊断提供可靠的数据支持。