BEL-7402人肝癌细胞操作步骤
点击次数:31 更新时间:2025-07-24
在完成BEL-7402人肝癌细胞的复苏和传代后,下一步需进行细胞培养的日常观察与换液操作。首先,将培养瓶置于倒置显微镜下,观察细胞的生长状态及密度。健康的BEL-7402细胞通常呈多边形或梭形,贴壁生长,若发现细胞形态异常(如变圆、脱落或出现空泡),可能提示污染或培养条件不佳,需及时处理。
当细胞密度达到80%-90%时,即可进行换液。换液前需预热培养基(含10%胎牛血清的DMEM)至37℃,随后在超净工作台中弃去旧培养基,用预热的PBS轻柔洗涤细胞2次,以去除代谢废物和死细胞。注意避免直接冲击细胞层,防止细胞脱落。洗涤后,加入新鲜培养基,体积以覆盖瓶底为宜(如T25培养瓶加入5-6mL)。
若需进行后续实验(如药物处理或转染),建议在换液后24小时内操作,此时细胞处于对数生长期,状态最佳。对于长期培养,需每隔2-3天换液一次,并定期传代以维持细胞活性。每次操作后,需详细记录细胞状态、传代次数及实验条件,以确保实验可重复性。